Микробиолошко испитивање спутума

Микробиолошки преглед је најважнија карика у дијагностичкој потрази и верификацији узрочника упале плућа. Он подразумева не само изоловање узрочника, већ и проучавање његових својстава, укључујући осетљивост на различите лекове са бактерицидним и бактериостатским дејством.

У ту сврху се користи метода сејања спутума на различите хранљиве подлоге. У узорку спутума достављеном у лабораторију, гнојне грудвице се одабиру и пажљиво исперу у Петријевој шољи изотопским раствором натријум хлорида, што до одређене мере омогућава њихово ослобађање од микрофлоре горњих дисајних путева. Сејање гнојних грудвица спутума се врши на различите хранљиве подлоге, чији је састав описан у посебним приручницима о микробиологији. Подлоге са сетвом се инкубирају на 37,5°C током 24 сата. Из узгајаних колонија се изолују чисте културе, идентификују се познатим микробиолошким методама и одређује се њихова осетљивост на антибиотике.

Да би се одредио квантитативни садржај микроорганизама, спутум се хомогенизује, меша са хранљивим бујоном, а од смеше се припремају узастопна десетострука разблажења која се инокулирају на Петријеве шоље са крвним агаром. Након 24 сата инкубације на 37,5°C, резултати се узимају у обзир, бројећи колоније истог типа по изгледу и узимајући у обзир степен разблажења материјала. Од колонија се припремају брисеви и испитују под микроскопом.

Тумачење резултата

Тумачење резултата микробиолошког прегледа спутума је прилично сложено, што се објашњава низом фактора. Већ је горе поменуто стално засејавање бронхијалног садржаја микрофлором горњих дисајних путева и усне дупље и често присуство у нормалном трахеобронхијалном садржају здравих људи већине најтипичнијих узрочника респираторних болести (пнеумококе, стрептококе, стафилококе итд.). У том смислу, изолација у спутуму током микробиолошких испитивања асоцијације различитих микроорганизама, од којих је већина у овом конкретном случају опортунистичка, изузетно отежава утврђивање узрочника болести. Стога, за тумачење резултата микробиолошког прегледа спутума, потребно је узети у обзир квантитативну превласт одређене врсте бактерија (више од 10 ⁶ -10 ⁷ мц/мл), појаву одређених микроорганизама у фази егзацербације и њихов нестанак током периода ремисије. Веома је важно узети у обзир клиничку слику болести.

Главни и могући узрочници различитих клиничких облика пнеумоније

Клинички облик пнеумоније	Главни патогени	Могући патогени
Крупус	Пнеумококе	Стрептококе, клебсијела
После грипа	Стафилококи, пнеумококи, клебсиела	Хаемопхилус инфлуензае, стрептококи
Апсцесирање	Стафилококе, бактероиди, мешана флора	Клебсијела, Псеудомонас аеругиноса
Аспирација	Бактероиди, анаеробне стрептококе	Стафилококе, пнеумококе
Постоперативни	Стафилококе	Пнеумококе, клебсијела
Интерстицијални оглас	Микоплазме	Патогени орнитозе, пситакозе
Секундарна пнеумонија код хоспитализованих пацијената без претходне антибактеријске терапије	Стафилококе, пнеумококе, клебсијела, бактероиди	Ешерихија коли, сератија итд.
Секундарна пнеумонија развијена на позадини антибактеријске терапије	Факултативно патогени микроорганизми	Псеудомонас, Сератиа, Клебсијела, Стафилококус, Протеус итд.
Код пацијената са хроничним бронхитисом	Пнеумококи, Хаемопхилус инфлуензае	Стафилококе, стрептококе
Код пацијената са алкохолизмом	Пнеумококе, хемофилус инфлуенце, клебсијела	Е. коли, протозое
Код синдрома стечене имунодефицијенције	Пнеумоцистис, гљивице	Цитомегаловируси
Код пацијената чију негу пружају спољне особе	Пнеумококе, стафилококе, хемофилна папила	Клебсијела, ешерихија коли

Приликом квантитативне процене резултата студије микробне контаминације код пацијената са упалом плућа, потребно је запамтити изузетно високу осетљивост овог индикатора на прописивање антибиотика. Чак и краткотрајно лечење антибактеријским лековима може довести до наглог смањења микробне контаминације, што не дозвољава адекватну процену резултата студије спутума. Стога је препоручљиво сакупити спутум пре прописивања антибиотског лечења.

Такође треба напоменути да се за култивацију интрацелуларних патогена пнеумоније (микоплазма, легионела, хламидија, рикеције) користе посебне селективне хранљиве подлоге. Рутинско микробиолошко тестирање коришћењем конвенционалних хранљивих подлога (агар-агар) никада не даје позитивне резултате. Стога, избор специфичних метода микробиолошког испитивања треба спровести уз учешће лекара који лечи, а који је дужан да обавести лабораторијског лекара о својим сумњама у вези са могућом улогом интрацелуларних патогена у појави пнеумоније код овог пацијента.

Треба додати да у стварној клиничкој пракси чак и технички савршен микробиолошки преглед спутума омогућава идентификацију патогена у не више од 40-60% случајева. Стога се за верификацију патогена могу користити и друге савремене методе истраживања. Информативни садржај бактериолошке студије може се значајно повећати коришћењем трахеобронхијалног аспирата, течности добијене током бронхоалвеоларне лаваже (БАЛ), бронхоскопије итд., уместо спутума, као биолошког материјала који се испитује.

Поред тога, за идентификацију узрочника пнеумоније може се користити метод имунофлуоресценције различитих биолошких материјала (материјал бронхоскопије, крв, плеурални садржај итд.), ПЦР дијагностичке методе и проучавање нивоа специфичних антитела у крвном серуму. Нажалост, ове дијагностичке методе још увек нису нашле широку клиничку примену и тренутно се користе само у великим специјализованим центрима и лабораторијама.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]