Рабдовируси су узрочници беснила и везикуларног стоматитиса

Беснило је акутна заразна болест коју изазива рабдовирус, а јавља се када особу уједе болесна животиња или када пљувачка болесне животиње дође у контакт са оштећеном кожом или слузокожом. Ова инфекција централног нервног система је скоро увек фатална.

Први помени болести која се преноси уједом пса и веома је слична по опису беснилу налазе се у клинастим глиненим плочицама из древне Месопотамије, које датирају из 3. миленијума пре нове ере. Вирус је изоловао и ослабио пасажима на мозгу зеца 1882. године И. Пастер.

Везикуларни стоматитис - болест коња, говеда и свиња, понекад и људи, која протиче бенигно - такође је узрокован рабдовирусом. Овај вирус је слабо патоген за људе. Боље је проучен од свих рабдовируса.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ]

Животни циклус

Рабдовируси су породица која обухвата три рода: Весикуловирус (10 вируса сисара, типичан је вирус везикуларног стоматитиса, или ВСВ); исавирус (6 серолошки сродних вируса, типичан је вирус беснила); Сигмавирус (једини представник је сигма-дрозофила вирус). Шест вируса који изазивају болести риба и 13 вируса који погађају биљке остају некласификовани. Рабдовирусе карактерише вирион у облику штапића или метка: дужине 60-400 nm и ширине 60-85 nm. Честице су окружене двослојном липидном мембраном сличном мембрани са избоченим шиљцима дужине 10 nm и ширине 3 nm. Испод мембране налази се рибонуклеокапсид са хеликоидним типом симетрије, у коме су пруге видљиве под електронским микроскопом. Геном рабдовируса представљен је негативним једноланчаним линеарним нефрагментираним молекулом РНК молекулске тежине од 3,8 MDa; Пронађено је пет гена који кодирају синтезу структурних протеина и одређен је редослед њиховог распореда. На 3'-крају налази се ген нуклеокапсидног протеина N (50 kDa). Следи га ген NSV протеина (30 kDa), једне од компоненти вирусне транскриптазе, која је део нуклеокапсида. Следећи ген кодира матрични протеин M (30 kDa) и облаже двослојну липидну мембрану изнутра. Затим долази ген протеина G (65 kDa), спољашњег гликопротеина вирусног суперкапсида. На 5'-крају налази се ген високомолекуларне компоненте вирусне транскриптазе, протеина L (160 kDa).

Интеракција рабдовируса са ћелијама и њихова репродукција одвијају се по следећој шеми: адсорпција вируса на ћелији (гликопротеин Г) - продирање у ћелију ендоцитозом - фузија са лизозомском мембраном - депротеинизација вируса. Под дејством вирионске транскриптазе (РНК полимеразе) формира се цРНК, која служи као матрица за синтезу вРНК и обавља функцију иРНК. Затим се на рибозомима ћелије домаћина синтетишу протеини специфични за вирус. Протеини М и Г су уграђени у плазма мембрану. Нуклеокапсид настао током интеракције вРНК са протеинима Н, Л и НС, пролазећи кроз мембрану, обавијен је суперкапсидом. Зрео вирион се одваја од ћелије пупљењем.

Вирус беснила је веома сличан вирусу везикуларног стоматитиса по својој структури и карактеристикама интрацелуларне репродукције. Важна карактеристика ових вируса је изражена инхибиција процеса биосинтезе протеина у ћелији домаћина блокирањем иницијације транслације. Постоји неколико сероваријант вируса везикуларног стоматитиса које се разликују по Г протеину, који је такође заштитни антиген.

Вируси се добро размножавају у пилећим ембрионима, ћелијама бубрега новорођених хрчака и у људским диплоидним ћелијским културама. У ћелијским културама, вирус везикуларног стоматитиса обично изазива цитопатске ефекте и ћелијску смрт, а понекад и симпластогенезу.

Вирус беснила има широк спектар домаћина. Све топлокрвне животиње су осетљиве на њега. Степен патогености различитих сојева вируса беснила за различите животиње није исти. Код неких врста слепих мишева, вирус се прилагодио само пљувачним жлездама, не изазивајући знаке болести; инфекција других животиња увек доводи до смрти.

Сојеви вируса беснила који циркулишу у природи међу животињама називају се улични сојеви. Они изазивају болести са прилично дугим периодом инкубације и обично формирају специфична инклузиона тела у цитоплазми ћелија. Заражене животиње могу искусити дуг период узнемирености и агресивности. Вирус може продрети у пљувачне жлезде и централни нервни систем. Узастопни пролази у мозгу зечева доводе до формирања фиксног вируса који није у стању да се даље репродукује ни у једној ћелији осим у нервним ћелијама. Фиксирани вирус се брзо репродукује, период инкубације је кратак, инклузије у ћелијама се ретко налазе. Овај вирус је патоген само за зечеве.

Вирус беснила није баш стабилан у спољашњој средини, брзо се инактивира када је изложен ултраљубичастим зрацима или сунчевој светлости. При кувању угине после 2 минута, на 60 °C - после 5 минута. Брзо га инактивирају раствори лизола, хлорамина, фенола, растварача масти и трипсина. У лешевима животиња, посебно на ниским температурама, преживљава до 4 месеца.

Имунитет

Пошто је беснило смртоносно, имунитет након инфекције није проучаван. Утврђено је да се антитела могу формирати током болести и након вакцинације. Имунитет након вакцинације траје до 1 године.

Епидемиологија беснила

Беснило је типична зоонотска болест. Главни извор и резервоар вируса су дивље и домаће месождерке: пси, мачке, вукови, шакали, лисице, творови, мунгоси, слепи мишеви. Болест се обично преноси путем угриза или цурењем пљувачке по оштећеној кожи или слузокожи, јер се вирус размножава у пљувачним жлездама животиње. Болесна животиња је заразна не само током болести, већ и током периода инкубације од 2-3 дана, понекад и више, пре него што се појаве први знаци болести.

[ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Симптоми беснила

Примарна репродукција вируса беснила одвија се у мишићном ткиву близу улазних капија, затим патоген продире у рецепторе периферних сензорних нерава и улази у централни нервни систем преко ендонеуријума Шванових ћелија или перинеуралних простора. Тамо се вирус репродукује у неуронима хипокампуса, продужене мождине, кранијалних нерава и симпатичких ганглија, узрокујући инфламаторне, дистрофичне и некротичне промене у нервном систему. Током овог периода, вирус се такође репродукује у ћелијама пљувачних жлезда.

Најкраћи инкубациони период јавља се код угриза у главу и руке, дужи - код угриза у доње екстремитете; генерално, варира од 8 до 90 дана. У развоју болести се разликују три фазе: прекурсори (депресија), узбуђење, парализа. У почетку се јављају анксиозност, страх, анксиозност, непријатне сензације у пределу уједа. После 1-3 дана јављају се изражено узбуђење, грчеви респираторних и гутајућих мишића, јавља се изражена хидрофобија (хидрофобија је други назив за ову болест). За овај период карактеристичне су агресија, слушне и визуелне халуцинације. Затим се развија парализа, а након 5-7 дана од почетка болести наступа смрт од парализе срчаног или респираторног центра.

Лабораторијска дијагностика беснила

Беснило се дијагностикује вирусоскопским, биолошким и серолошким методама. Мождано ткиво (кора и мали мозак мозга, Амонов рог, продужена мождина) и ткиво пљувачних жлезда се испитују у хистолошким пресецима или размазима угинулих животиња и људи. Специфичне еозинофилне инклузије (Бабеш-Негријева телашца) налазе се у пирамидалним ћелијама можданог ткива. Налазе се у цитоплазми близу једра и представљају кластере вирусних нуклеокапсида. Њихова појава је последица отежаног сазревања вириона у нервним ћелијама. Бабеш-Негријева телашца се детектују помоћу посебних метода бојења (Романовски-Гимза, Ман, Туревич, Муромцев, итд.). Имају карактеристичну грануларну структуру са базофилним гранулама на ацидофилној позадини, њихова величина је 4-10 μм. Мана ове методе је што се може користити тек након смрти особе или животиње.

Вирусни антиген се може детектовати у истим препаратима коришћењем директне или индиректне имунофлуоресцентне реакције.

Вирус беснила може се изоловати из пљувачке болесних људи или животиња, као и из свежег материјала за аутопсију (мождано ткиво, ткиво субмандибуларних пљувачних жлезда) интрацеребралном инфекцијом белих мишева и зечева или хрчака - интрамускуларно. Животиње развијају парализу након чега следи смрт. Мозак угинуле животиње треба прегледати ради откривања Бабес-Негријевих телашца или вирусног антигена коришћењем имунофлуоресцентне реакције.

Антитела се могу детектовати код вакцинисаних особа коришћењем неутрализације, фиксације комплемента, имунофлуоресценције и имуносорбентних реакција (RIM и IFM).

Специфична превенција и лечење беснила

Превенција беснила састоји се од сузбијања беснила код животиња и спречавања развоја болести код људи које је ујела или лизала болесна животиња. Програм за елиминисање беснила код копнених животиња мора се разматрати у два аспекта:

1. искорењивање беснила код паса у градским подручјима и
2. побољшање природних жаришта инфекције беснилом.

Искуство многих земаља убедљиво доказује могућност контроле градских епизоотија регистрацијом и имунизацијом паса. Међутим, за потпуно елиминисање инфекције беснилом неопходно је побољшати њена природна жаришта, а истребљење дивљих месождера даје само привремени и локални резултат и прети развојем непожељних еколошких последица. У иностранству већ постоји велико позитивно искуство у спречавању беснила међу дивљим животињама (лисице, ракуни) храњењем мамаца који садрже вакцину. Оралне вакцине против беснила сматрају се веома перспективним у том погледу: жива модификована вакцина са целим вирионом од атенуираних сојева вакцине (САД-Берн, Внуково-32) и рекомбинантна генетски модификована орална вакцина која користи вирус вакциније као вектор, експресујући ген Г-протеина вируса беснила.

У случају уједа или цурења слине, потребно је темељно опрати рану или кожу на месту контакта са пљувачком сапуницом, каутеризовати рану алкохолним раствором јода и започети специфичну профилаксу вакцином против беснила и гама глобулином против беснила. Уместо раније коришћене високо реактогене Фермијеве вакцине (из можданог ткива оваца заражених фиксним вирусом), сада се за превенцију болести препоручује инактивирана културна вакцина против беснила, која се прави на ћелијској култури зараженој атенуираним вирусом беснила (сој Внуково-32). Хитна терапијска и профилактичка вакцинација се спроводи вакцином или вакцином у комбинацији са гама глобулином против беснила према шемама наведеним у упутству за њихову употребу. Шема вакцинације се одређује тежином уједа, његовом локализацијом, временом протеклим од уједа, информацијама о животињи која је ујела и другим околностима.