Цоринебацтериае

Дипхтерија је акутна заразна болест претежно из детињства, што се манифестује дубоком интоксикацијом тијела са дифтеријским токсином и карактеристичним фибринозним инфламацијом на месту патогена. Име болести потиче од грчке ријечи дипхтхера - кожа, филм, јер се у мјесту размножавања патогена формира густи сиво-бели филм.

Узрочник агенса дифтерије, Цоринебацтериум дипхтхериае, први пут је открио 1893. Године Е. Клебс у резанце из филма, добијеног у чистој култури 1884. Године од Ф. Леффлер. Године 1888. Е. Ру и А. Иерсен открили су његову способност производње егзотоксина, који игра главну улогу у етиологији и патогенези дифтерије. Потврда 1892. Године о антитоксичном серуму Е. Беринга и његова употреба од 1894. Године за лечење дифтерије омогућила је значајно смањење смртности. Успјешан напад на ову болест започео је након 1923. Године у вези са развојем методе Г.Јонон за добивање дифтеријског токсоида.

Узрочник дипхтерије припада роду Цоринебацтериум (класа Ацтинобацтериа). Морфолошки, одликује се чињеницом да су ћелије у облику клупе згушнуте на крајевима (грчки согупе - мач), формирају грану, посебно у старим културама, и садрже грануларне укључке.

Род Цоринебацтериум обухвата велики број врста који су подељени у три групе.

• Цоринебацтериа су паразити људи и животиња и патоген за њих.
• Цоринебацтериа, патогена за биљке.
• Непатогене коринебактерије. Многе врсте Цоринебацтериум су нормални становници коже, слузокоже, назофаринкса, очију, респираторног тракта, уретре и гениталних органа.

[1], [2], [3], [4], [5]

Морфологија цоринебацтериа

Ц. Дифтерије - равне или благо закривљене штапићи од 1.0-8.0 μм у дужини и 0.3-0.8 μм у пречнику, не формирају споре и капсуле. Врло често имају отеклине на једном или оба краја, често садрже метахроматичне грануле - зрнатог зрна (полиметафосфати), који када плавичи с метилен плавом стижу плавичасто-љубичасту боју. За њихову детекцију предлаже се посебан метод за бојење према Неиссеру. У том случају, штапови су обојени сламе жутом, а зрна у облику су тамно смеђене и обично се налазе на половима. Цоринебацтериум дипхтхериае је добро обојен са анилин бојама, Грам-позитивним, али у старим културама је често обојен и има негативну боју од Грама. Одликује се изразитим полиморфизмом, посебно у старим културама и под утицајем антибиотика. Садржај Г + Ц у ДНК је око 60 мол%.

Биокемијске особине цоринебацтериа

Дифтерија бациллус је аеробе или факултативно температуре оптимални анаеробна за раст 35-37 ° Ц (15-40 ° раста граничног Ц), оптимална пХ 7.6-7.8. Медијима храњивих материја није веома захтјевно, али боље се развија на медијима који садрже серум или крв. Дифтерија селективна за бактеријама ваљањем или серуму средње Роук Леффлер, раст на њих појављују у 8-12 сати као конвексни, величине чиоде колоније сивкасто бело или жућкасто-крем боје. Њихова површина је глатка или благо грануларна, на периферији колоније донекле транспарентнија него у центру. Колоније се не спајају, што резултира културом која изгледа као шагринска кожа. Раст Бротх се манифестује као униформна облак или бујон остаје транспарентан, и формира се на његовој површини мекој филма који постепено згушњава, мрви и љуспица настанити на дно.

Карактеристика бактерија дифтерије је њихов добар раст на крвним и серумским медијумима који садрже концентрацију калијум-тулурита који сузбијају раст других бактеријских врста. Ово је последица чињенице да Ц. Дипхтхериае реконструише калијум тулурит у метални телуриум, који, депонован у микробним ћелијама, даје колонијама карактеристичну тамно сиву или црну боју. Употреба таквих медија повећава проценат сетве бактерија дифтерије.

Цоринебацтериум дипхтхериае се ферментира глукоза, малтоза, галактозу формирају киселину без гаса, али не ферментира (обично) сахароза имају тсистиназу нема уреазе и не формирају индол. На овим основама, могу се разликовати од оних цоринеформ бактерија (дипхтхероидс) који су чешће јављају на слузокожи ока (Цоринебацтериум керосус) и назофаринкса (Цоринебацтериум псеиидодипхтхеритицум) и других дипхтхероидс.

У природи постоје три главне варијанте (биотип) дифтеријског бацила: гравис, интермедини и митис. Они се разликују у морфолошким, културним, биохемијским и другим својствима.

Подела бактерије дифтерије у биотипе је направљена узимајући у обзир облике дифтерије код пацијената са којима се расподељује са највећом фреквенцијом. Тип грависа се чешће изолује од пацијената са тешком дифтеријом и узрокује групне ракете. Тип митис узрокује лакше и спорадичне случајеве болести, а тип интермедијума заузима средњу позицију између њих. Цоринебацтериум белфанти, који се раније приписивао биотичном митису, изолован је у одвојеном, четвртом, биотипу. Његова главна разлика од биотипа грависа и митиса је способност за обнављање нитрата у нитритима. Цинснебацтериум белфанти имају изражене адхезивне особине, а међу њима су и токсигенске и нонтоксигене варијанте.

[6], [7], [8], [9], [10]

Антигенска структура цоринебацтериа

Цоринебацтериум је врло хетерогена и мозаик. Узрочници агенса дифтерије свих три врсте су открили неколико десетина соматских антигена, према којима су подељени на серотипе. У Русији је усвојена серолошка класификација према којој се разликују 11 серотипова дифтеријских бактерија, од којих су 7 примарна (1-7) и 4 додатна, ретко се појављују серотипи (8-11). Шест серотипова (1, 2, 3, 4, 5, 7) су грависног типа, а пет (6,8,9,10,11) су типа митиса. Недостатак методе серотификације је да многи сојци, нарочито не-токсигени, имају спонтану аглутинацију или полиагглутинабилност.

[11]

Фаготипирование Цоринебацтериум дипхтхериае

За диференцирање бактерија дифтерије предложене су различите шеме за фагирање. У Шеми Д. М. Крилова користећи скуп фага 9 (А, Б, Ц, Д, Ф, Г, Х, И, К) могу куцати већину токсигених и нонтокигениц сојева типа гравис. Имајући у виду осетљивост према поменутом фага, као култура, антигене особине и способност да синтетишу коритсини (бактерицидное протеине) МД Крилов додељен одвојене групе 3 тип цоринебацтериа гравис (И-ИИИ). У сваком од њих постоје подгрупе токсигених и нонтоксигених аналога узрочника узрочника дифтерије.

Отпор коринебактерија

Цоринебацтериум дипхтхериае показује велику отпорност на ниске температуре, али брзо пада на високој температури: на 60 ° Ц - 15-20 мин, при кључању - после 2-3 мин. Сва дезинфекциона средства (лизол, фенол, хлорамин, итд.) У најчешће коришћени концентрацији уништавају их за 5-10 минута. Међутим, узрочник дифтерије толерише бушотину за сушење и може дуго остати одржив у сувљеној слузи, пљувачки, у честицама прашине. У фино распршеном аеросолу, бактерије дифтерије остану одрживе 24 до 48 сати.

Фактори патогености цоринебацтериа

Патогеност Цоринебацтериум дипхтхериае одређује присуство више фактора.

Фактори адхезије, колонизације и инвазије

Структуре одговорне за адхезију нису идентификоване, али без њих дифтеријски бацилус није могао колонизовати ћелије. Њихова улога врше неке компоненте ћелијског зида патогена. Инвазивна својства узрочника су повезана са хијалуронидазом, неураминидазом и протеазом.

Токсични гликолипид који се налази у ћелијском зиду патогена. Представља 6,6'-диестра трехалозе садржи коринемиколовуиу киселину (С32Н6403) и коринемиколиновуиу киселине (Сз2Н62Оз) ин еквимоларној вези (трехалозу 6,6'-дикоринемиколат). Гликолипид има деструктивни ефекат на ћелије ткива на месту ширења патогена.

Ексотоксин, који одређује патогеност патогена и природу патогенезе болести. Нонтоксигене варијанте Ц. Дипхтхериае не изазивају дифтерију.

Ексотоксин се синтетише као неактиван прекурсор, један полипептидни ланац са м. 61 кД. Његова активација се изводи сопствено бактеријске протеазе која сече у два полипептида повезан дисулфидним веза између пептида А (Моларна маса 21 кДа) и Б (Моларна маса 39 кДа). Акцептор Пептид обавља функцију - признаје рецептор везује за њега и генерише интрамембраноус канал кроз који улази у ћелију и пептиду продаје биолошке активности токсина. Пептид А је ензим АДП-рибозилтрансферазу која обезбеђује аденозин дифосфат трансфер рибоза са НАД једном од остатка амино киселине (хистидин) протеина елонгације фактор ЕФ-2. Као резултат модификације ЕФ-2 губи своју делатност, а то доводи до супресије синтезе протеина у рибозома корака транслокације. Токсин се синтетизује само такав Ц. Дипхтхериае, који су у својим хромозомске гени Средње претварања пропхаге. Оперон кодира синтезу токсина је моноцистрониц, се састоји од 1.9 хиљада базних парова и има токП промотера и 3 ситес :. ТокС, Тока и токБ. Плот токС кодира 25 аминокиселинских остатака сигнални пептид (обезбеђује принос отрова кроз мембрану у периплазмички простор бактеријске ћелије), Тока - 193 аминокиселинских остатака пептида А и токБ - 342 аминокиселинских остатака у пептиду токсина. Губитак ћелијске пропхаге или мутације у токс-оперону чини ћелију малотоксигеном. Напротив, лисогенизатион нонтокигениц Ц. Дипхтхериае претварање фага их претвара у токсигених бактерије. Ово је доказано недвосмислено: токигеницити дифтерије бактерија зависи од њиховог лисогенизатион конвертује Ток-коринефагами. Коринефаги интегрисан у хромозом цоринеформ бактерија помоћу рекомбинације механизам сите-специфиц, и дифтерије бактеријских сојева може да садржи у свом хромозому на 2 местима рекомбинације (АТТБ) и коринефаги интегрисана у свакој од њих истој фреквенцији.

Генетичка анализа низа нонтокигениц соја дифтерије бактерија које користе означене ДНК проба имајући фрагмената Ток-оперону коринефага су показали да хромозоми су ДНК секвенце хомологне Ток-оперону коринефага али ни кодирају неактивне полипептиде или су у " тихо "стање, тј. Неактивно. У вези са овим постоји веома важно епидемиолошки питање да ли нонтокигениц дифтерија бактерије претварају у токсигених ин виво (у организму), баш као што то чини ин витро? Могућност таквих конверзију нонтокигениц културама у цоринебацтериа токсигених коришћење конверзије фаг је приказан у експериментима на заморци, пилетине ембриона и белих мишева. Међутим, да ли се то догоди у току природног процеса епидемије (и ако постоји, колико често), док није било могуће утврдити.

Због чињенице да је токсин дифтерије у телу пацијената селективан и специфичне ефекте на појединим системима (углавном погађа симпатхо-адреналне систем, срце, крвне судове и периферних нерава), онда је очито, не само што инхибира биосинтезу протеина у ћелијама, али и изазива друге поремећаје метаболизма.

Да би се открила токсичност бактерија дифтерије, могу се користити следеће методе:

• Биолошки тестови на животињама. Интракутана инфекција морских свиња са филтром бујонске културе бактерија дифтерије изазива им некрозу на месту примене. Једна минимална смртоносна доза токсина (20-30 нг) убија морски свинак масе 250 г са субкутаном ињекцијом на 4-5 дана. Најкритичнија манифестација дјеловања токсина је пораст надбубрежних жлезда, увећана су и оштро хиперемична.
• Инфекција пилићких ембриона. Диптеријски токсин узрокује њихову смрт.
• Инфекција ћелијских култура. Дифтеријски токсин узрокује јасан цитопатски ефекат.
• Метода чврсто-фазног ензимско везаног имуносорбентног теста помоћу антитоксина означених са пероксидазом.
• Употреба ДНА сонде за директно откривање токс-оперона у хромозому бактерија дифтерије.

Међутим, најједноставнији и најчешћи начин утврђивања токсичности бактерија дифтерије је серолошка метода преципитације у гелу. Суштина је следећа. Трака са стерилном филтер папира димензија 1,5 к 8 цм навлажи антитоксичан дифтерије серум садржи 500 АЕ 1 мЛ, и нанети на површину медијума у петри шољи. Чаша се осуши у термостату 15-20 минута. Тестне културе се инокулирају плочама са обе стране папира. Неколико сојина сеје на једној шољи, од којих један, познат као токсичан, служи као контрола. Чаше са културама су инкубиране на 37 ° Ц, Дуе интердиффусион гел отрова и токсин резултати дозвољавају 24-48 сати. На месту њихове интеракције формира јасну преципитина линију која спаја са преципитина контролном линије токсигених соју. Траке од неспецифичног падавине (су формирани, ако серум Серум присутан поред малих количина других анти-микробне антитела) појављују касније су благи и не споји траком контролног преципитатион соја.

Постинфективни имунитет

Снажни, упорни, практично доживотни, поновљени случајеви болести се ретко примећују - код 5-7% пацијената који су се опоравили. Имунитет је углавном антитоксичан, антимикробна антитела су мање важна.

Да би се проценио ниво имунитета антидифтерије, Шиков тест је раније био широко коришћен. У том циљу, 1/40 Дим токсина за морске свиње интрадермално је убризгано у децу у запремини од 0,2 мл. Ако нема антитоксичан имунитет 24-48 сати на месту убода појављује црвенило и отицање више од 1 цм у пречнику. Таква позитивна реакција Сцхицк указује или на потпуно одсуство анти-токсин или да његов садржај мања од 0,001 АУ / мл крви. Негативна реакција Чика се примећује када је садржај антитоксина у крви већи од 0,03 АЕ / мл. Ако је садржај антитоксина испод 0,03 АЕ / мл, али изнад 0,001 АЕ / мл, реакција Схицк може бити или позитивна или понекад негативна. Поред тога, сам токсин има изразито алергено својство. Стога, да би се одредио ниво имунитета антидипхтхериа (квантитативни садржај отрова) боље користити ТПХА диагностицум са еритроцита сензибилисане дифтерија токсоид.

Епидемиологија дифтерије

Једини извор инфекције је особа - болесна, освјежавајућа или здрава носач. Инфекција настаје путем капљица у ваздуху, прашину стране, као и кроз различите предмета који су били у употреби у пацијентима или здравим бактеријама носачима: кување, књиге, постељину, играчке, итд У случају хране инфекције (млеко, павлаке, итд .... Итд.), могуће је инфицирати путем прехрамбене руте. Најмасовније излучивање патогена јавља се у акутном облику болести. Међутим, најпосјећенији епидемиолошки важни су људи са избрисаним, атипичним облицима обољења, јер често нису хоспитализовани и нису одмах видљиви. Пацијент са дифтеријом је заразан током цијелог периода болести и дио периода опоравка. Просјечни период транспорта бактерија у опоравком варира од 2 до 7 недеља, али може трајати до 3 мјесеца.

Посебну улогу у епидемиологији дифтерије играју здрави бактеријски носачи. У условима спорадичног морбидитета, они су главни дистрибутери дифтерије, доприносећи очувању патогена у природи. Просечно трајање пријевоза токсигених сојева је нешто мање (око 2 месеца) од нонтоксигених сојева (око 2-3 месеца).

Разлог за формирање здравог носиоца токсигене и нонтоксигенске бактерије дифтерије није у потпуности обелодањен, јер чак и висок ниво антитоксичног имунитета не осигурава увек потпун отпуст организма од патогена. Можда је ниво антибактеријског имунитета од извесног значаја. Превоз токсигених сева бактерија дифтерије је примарног епидемиолошког значаја.

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19],

Симптоми дифтерије

Људи свих старосних доба су подложни дифтерији. Средство може продрети у људско тело кроз слузокоже различитих органа или кроз сломљен кожу. У зависности од процеса локализације разликују дифтерија грла, носа, грла, уха, очи, гениталије и кожу. Мешовити облици су могући, нпр дифтерије уста и коже, итд инкубације - .. 2-10 дана. Уколико је клинички значајна форма дифтерије на месту локализације патогена развија карактеристичан фибринозан упалу слузнице. Отров у продукцији патогена, најпре утиче епителне ћелије, а онда околних крвних судова, повећавајући њихову пропустљивост. Преливи ексудат садржи фибриноген, коагулацију што резултира формирањем на површини слузнице Филмови нападима сивкасто-бели који чврсто лемљене на предмет ткиво и кидање од ње узрок крварења. Последица поражења крвних судова може бити развој локалног едема. Посебно је опасно је дифтерија ждрела, јер може изазвати дифтерије сапи због едема ларинкса слузокоже и гласних жица, која је раније умре од гушења 50-60% пацијената са дифтерије децом. Диптеријски токсин, улазећи у крв, изазива опћу дубоку интоксикацију. Она утиче углавном на кардиоваскуларни, симпатички-надбубрежне система и периферних нерава. Стога, симптоми дифтерије се формирају из комбинације локалних симптома, у зависности од локације капијом, а општи симптоми проузрокована тровањем токсин и манифестују се у облику адинамија, летаргије, бледило коже, снижава крвни притисак, миокардитис, парализа и друге поремећаје периферних нерава. Дифтерија у вакцинисане деце, и ако постоји, токови су углавном благе и без компликација. Морталитет пре примене серотхерапи и антибиотике износила 50-60%, сада - 3-6%.

Лабораторијска дијагностика дифтерије

Једини метод микробиолошке дијагнозе дифтерије је бактериолошки, са обавезним испитивањем изоловане културе бактерија за токсигеницност. Бактериолошке студије о дифтерији се изводе у три случаја:

• за дијагнозу дифтерије код деце и одраслих са акутним инфламаторним процесима у пределу грла, носа, назофаринкса;
• о епидемиолошким индикацијама особа које су биле у контакту са извору узрочника дипхтерије;
• особе новоименоване у сиротишта, дневне вртиће, школе за дијецу и друге посебне установе за дјецу и одрасле, како би се међу њима идентификовале могуће носиоци бактерија дипхтхериа бациллус.

Материјал за студије су слуз из грла и носа, филм са крајника или другим слузокоже, које су место капијом патогена. Усеви производе теллуритовие о серуму или крви и медијума истовремено деспреад серум медиум Роук (искључен коњског серума) или Леффлер (3 партс говеђег серума и 1 део шећера чорбе), где цоринебацтериа појављује раст већ после 8-12 сати. Издвојена култура је идентифициран скуп морфолошких, културних и биохемијских својстава, ако је могуће, користе методе сивог и фагинског писања. У свим случајевима, неопходно је проверити токсичност помоћу једног од горе наведених метода. Морфолошке карактеристике Цоринебацтериум бољег студија и употребљава следеће методе припреме бојења размаза: Грам, Неиссер и метилен плаве (или толуидине плаве).

Лечење дифтерије

Специфичан третман за дифтерију је употреба антитоксичног серума антидифтерије која садржи најмање 2000 ИУ по мл. Серум се даје интрамускуларно у дозама од 10 000 до 400 000 ИУ, у зависности од тежине тока обољења. Ефикасан метод лечења је употреба антибиотика (пеницилина, тетрациклина, еритромицина и сл.) И препарата сулфаниламида. Да би се стимулисао развој сопствених антитоксина, може се користити анатокин. За ослобађање бактеријског транспорта требају се користити они антибиотици којима је овај сноп цоринебацтериа веома осјетљив.

Специфична профилакса дифтерије

Главни метод борбе против дифтерије је маса рутинска вакцинација становништва. У том циљу, различите изведбе користе вакцине, укључујући комбинације, тј. Е. Намењен истовременог стварања имунитета против неколико патогена. Најчешћа вакцина у Русији била је ДТП. Она се адсорбује на алуминијум хидроксид каша пертуссис бактерија уништено са формалином или тимеросал (20 милијарди у 1 мл), а садржи токоид флокулацију дозу од 30 јединица и 10 јединица везивања 1 мл тетанус токсоид дифтерије. Вакцинисана деца од 3 месеца старости, а затим провести ревакцинација: прва 1.5-2 година касније у доби од 9 до 16 година, а затим сваких 10 година.

Захваљујући масовној вакцинацији започетој у СССР 1959. Године, инциденција дифтерије у земљи до 1966. Године у поређењу са 1958. Године смањена је за 45 пута, а стопа из 1969. Године износила је 0,7 на 100 000 становника. Следи у осамдесетим. КСКС век. Смањење обима вакцинација довело је до озбиљних посљедица. У периоду 1993-1996. Русија је погођена епидемијом дифтерије. Одрасли су били болесни, углавном нису вакцинисани, а деца. Године 1994. Регистровано је готово 40 хиљада пацијената. У вези с тим, настављена је масовна вакцинација. Током овог периода, вакцинисано је 132 милиона људи, укључујући 92 милиона одраслих. Током 2000-2001, покривеност дјеце са вакцинацијом у прописаном периоду износила је 96%, а вакцина за повишицу - 94%. Захваљујући томе, инциденција дифтерије у 2001. Смањена је за 15 пута у односу на 1996. Годину. Међутим, како би се инциденца спустила у појединачне случајеве, неопходно је покрити најмање 97-98% дјеце у првој години живота уз вакцинацију и осигурати у наредним годинама масовну повећану дозу. Да би се постигла потпуна елиминација дифтерије у наредним годинама, мало је вероватно да ће бити могућа због честог носиоца токсигених и нонтоксигених бактерија дифтерије. За решавање овог проблема потребно је неко време.