Узрочник туларемије

Туларемија је примарна болест животиња (глодара), код људи се јавља као акутна заразна болест са разноврсном клиничком сликом и спорим опоравком. Узрочника туларемије - Francisella tularensis - открили су Г. Мекој и С. Чепин 1912. године током епизоотије међу земљаним веверицама у подручју са језером Туларе (Калифорнија), детаљно ју је проучио Е. Франсис, у чију част је род и добио име.

То су веома мали, величине 0,2-0,7 µm, кокоидни или елипсоидни полиморфни штапићи, који врло често дају биполарну боју када се користе посебне методе бојења; непокретни су, грам-негативни, не формирају споре; каталазно-негативни, формирају H2S, стриктни аероби, температурни оптимум за раст је 37 °C, pH 6,7-7,2. Вирулентни сојеви имају капсулу, формирају киселину без гаса током ферментације неких угљених хидрата (глукоза, малтоза, маноза, фруктоза, декстрин), степен ферментације варира међу сојевима, садржај G + C у ДНК је 33-36 mol %. F. tularensis не расте на обичним подлогама. Г. Мекој и Ш. Чепин су користили подлогу са коагулисаним жуманцем. На њој бацил туларемије расте у облику нежних малих колонија које подсећају на капи росе, затим култура добија карактер нежног шагренског премаза са слабо израженом мукозном конзистенцијом. Е. Франсис је предложио хранљиви агар за узгој бацила туларемије, који садржи 0,05-0,1% цистина, 1% глукозе и 5-10% крви. На таквој подлози, раст је бујнији и храпавији: колоније су округле са глатком површином, млечне боје, влажне, са слузавом конзистенцијом, окружене карактеристичним зеленим ореолом. Раст је спор, колоније достижу максималну величину 3-5. дана (1 - 4 мм). Бактерије туларемије се добро размножавају у жуманчаној кеси пилећег ембриона, узрокујући његово угинуће 3-4. дана.

За раст F. tularensis неопходне су следеће аминокиселине: аргинин, леуцин, изолеуцин, лизин, метионин, пролин, треонин, хистидин, валин, цистин, за неке подврсте - серин, тирозин, аспарагинска киселина; поред тога, за раст су им потребни и пантотенска киселина, тиамин и Mg2 јони. Узимајући у обзир ове карактеристике, синтетичке подлоге се могу користити за култивацију F. tularensis.

Род Francisella припада класи Gammaproteobacteria, филуму Proteobacteria. Овај род такође укључује F. novicida, чија патогеност за људе није утврђена.

Узрочник туларемије је интрацелуларни паразит. Његова вируленција је последица капсуле која инхибира фагоцитозу; неураминидазе, која подстиче адхезију; ендотоксина; алергених својстава ћелијског зида, као и способности репродукције у фагоцитима и сузбијања њиховог убилачког дејства. Механизми вируленције још увек нису дешифровани. Поред тога, код бацила туларемије пронађени су рецептори способни за интеракцију са Fc фрагментима IgG имуноглобулина. Као резултат таквог везивања, поремећена је активност система комплемента и макрофага.

F. tularensis у S-облику (вирулентан) има два антигена - O и Vi (капсуларни антиген). O-антиген је сродан антигенима бруцеле. Дисоцијација S->SR->R доводи до губитка капсуле, вируленције и имуногености. Врста F. tularensis је подељена у три географске расе (подврсте):

• Холарктички (ниско патоген за домаће зечеве, не ферментише глицерол и нема ензим цитрулин уреидазу, који се налази у земљама северне хемисфере);
• Централноазијска (ниско патогена за зечеве, има цитрулин уреидазу и ферментише глицерол);
• Неарктик (амерички), патогенији за зечеве, ферментише глицерол, има цитрулин уреидазу.

Поред тога, сојеви америчке и централноазијске подврсте имају фосфатазну активност, која је одсутна код сојева холарктичке подврсте.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Отпорност узрочника туларемије

F. tularensis је прилично стабилан у спољашњој средини, посебно ако се налази у патолошком материјалу. У крми, житарицама, контаминираној излучевинама болесних глодара, преживљава до 4 месеца; у води - до 3 месеца; у леду - више од 1 месеца. Осетљив је на директну сунчеву светлост (угине за 30 минута), високу температуру (на 60 °C угине за 10 минута), под утицајем 3% раствора лизола, 50% алкохола, формалина и других антисептика угине за 5-10 минута.

Епидемиологија туларемије

Главни резервоар туларемије у природи су глодари, међу којима се епизоотије примећују у природним условима. Људи се заражавају само од животиња; патоген се не преноси са особе на особу. Патоген је пронађен код 82 врсте глодара и лагоморфа, а најчешће се налази код представника 4 породице: мишоликих глодара (Muridae), зечева (Leporidae), веверица (Sciuridae) и џербоа (Dipodidae). У Русији су главни преносиоци мишолики глодари: водени пацови, обичне волухарице, кућни мишеви и бизамски пацови.

Према осетљивости на туларемију, животиње се могу поделити у четири групе:

• Група 1 - најосетљивије (волухарице, водени пацови, кућни мишеви, бели мишеви, заморци и неки други). Минимална смртоносна доза је једна микробна ћелија;
• 2. група - мање осетљиве (сиви пацови, гофери итд.). Минимална смртоносна доза је 1 милијарда микробних ћелија, међутим, једна микробна ћелија је довољна да зарази неке од њих;
• 3. група (предатори - мачке, лисице, творови). Отпорни на високе заразне дозе, болест протиче без видљивих манифестација;
• Група 4 - имуна на туларемију (пакари, хладнокрвне животиње, птице).

За људе, минимална инфективна доза је једна микробна ћелија. Људи се могу заразити на све могуће начине: директним и индиректним контактом са болесним глодарима, њиховим лешевима или предметима зараженим глодарима; алиментарним (конзумирањем хране и воде заражене глодарима), ваздушном прашином и преношењем. Инфекција бактеријама туларемије утврђена је код 77 врста зглавкариша који сишу крв. Од посебног значаја су иксодидни крпељи, код којих патоген перзистира током целог живота, па чак се и трансоваријално преноси на потомство. Ове околности доприносе успостављању болести у природи. Људи се заражавају крпељима не уједима, већ као резултат доспевања патогена на кожу заједно са изметом крпеља.

У Русији постоји 7 главних типова пејзажа природних жаришта туларемије: мочварни, ливадско-пољски, степски, шумски, подножни, тундрски и тугајски (пустињски).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Симптоми туларемије

Узрочник туларемије продире у тело кроз спољашње овојнице (оштећену и нетакнуту кожу и слузокожу). На месту продора често се формирају чиреви. Кроз лимфне судове, бактерије улазе у регионални лимфни чвор и слободно се размножавају у њему; инфламаторни процес доводи до формирања бубона. Одатле патоген продире у крв, бактеријемија изазива генерализацију процеса, у њега су укључени различити органи и ткива, чија пролиферација бактерија доводи до стварања гранулома и некротичних чирева. Алергијско реструктурирање организма повезано је са бактеријемијом и генерализацијом. Период инкубације туларемије варира од 2 до 8 дана. Болест почиње акутно: јављају се грозница, главобоља, болови у мишићима, хиперемија лица. Даљи ток зависи од места улазних врата, према чему се разликују следећи клинички облици туларемије: улцерозно-гландуларна (бубонска), очно-гландуларна, ангинозно-гландуларна, абдоминална и плућна. Морталитет код туларемије не прелази 1-2%.

Пост-инфективни имунитет је јак, перзистентан, у већини случајева доживотан, има ћелијску природу, узрокован је углавном Т-лимфоцитима и макрофагима, у мањој мери - антителима. Фагоцитоза код особа са имунитетом је потпуна.

Лабораторијска дијагностика туларемије

За дијагностиковање туларемије користе се све микробиолошке методе. Студија се спроводи у безбедним лабораторијама. Материјал за студију - крв, бубопункција, стругање чира, коњунктивални исцедак, фарингеални плак, спутум итд. - одређује се клиничким обликом болести. Поред тога, за студију се могу узети вода и прехрамбени производи. У природним жариштима туларемије спроводе се планиране систематске студије ради изолације узрочника туларемије од глодара.

Бактериолошка метода дијагностиковања туларемије код људи ретко даје позитивне резултате. Чиста култура се обично изолује након акумулације на осетљивим лабораторијским животињама. Бели мишеви и заморци се користе за биолошке тестове. Мишеви се инфицирају поткожно, заморци - интраперитонеално; животиње угину 3-6. дана, понекад после мраза. Заражене животиње се држе у посебним условима (као код дијагностиковања куге) и посматрају 6-14 дана. Експерименталне животиње не угину 7-15 дана, кољу се 15-20. дана, а лешеви се обдукују. У присуству туларемије, патолошке и анатомске промене се откривају у облику продуктивног процеса са некрозом. Чиста култура се изолује из унутрашњих органа на жуманцаној подлози, глукозно-цистеинском крвном фокусу итд. Идентификација се заснива на морфологији и тинкторијалним својствима патогена, одсуству раста на МПА и аглутинацији са хомологним серумом. патогеност за беле мишеве и заморце. Чиста култура се може изоловати инфекцијом 12-дневних пилећих ембриона и жуманчане кесе. Да би се изоловала чиста култура патогена из воде, она се центрифугира или филтрира кроз бактеријске филтере, а талог се користи за инфекцију лабораторијских животиња. Приликом проучавања прехрамбених производа, они се испирају са МП Б, центрифугирају, а талог се користи за инфекцију лабораторијских животиња.

Истовремено са бактериолошким прегледом, из материјала који се испитује припремају се брисеви-отисци и боје се према Романовском-Гимзи. У брисевима из органа могу се открити мале кокоидне и штапићасте бактерије, које се налазе интрацелуларно и у облику кластера, формирајући нежну капсулу.

За дијагностику се користе детаљна реакција аглутинације, РПГА и РИФ.

Алергијски тестови се користе за рану дијагностику туларемије (од 5. дана од почетка болести). Користе се две врсте туларина и, сходно томе, користе се два начина њихове примене: кутани и интрадермални. Пошто је концентрација алергена у обе врсте туларина различита, неприхватљиво је користити кутани туларин за интрадермални тест и обрнуто. Резултати алергијске реакције се узимају у обзир динамички након 24, 36, 48 сати. Инфилтрат пречника најмање 5 мм сматра се позитивним резултатом. Код вакцинисаних особа или оних који су прележали туларемију, алергијски тестови остају позитивни током више година (анамнестичка реакција).

Специфична превенција туларемије

За специфичну превенцију користи се вакцина против туларемије, коју су 1930. године добили руски војни лекари Б. Ја. Елберт и Н.А. Гајски из соја Ме 15. Вакцина пружа јак имунитет 5-6 година приликом инфекције европском и холарктичком подврстом и ефикасна је против америчке варијанте патогена. Вакцинација се спроводи према епидемиолошким индикацијама, као и за особе које припадају ризичним групама. Дозвољена је истовремена вакцинација против туларемије и бруцелозе; туларемије и куге, као и против туларемије и неких других инфекција.

Неспецифична превенција туларемије је иста као и код осталих зооноза и усмерена је првенствено на сузбијање глодара.