Агрегација тромбоцита са ристоцетином (фон Вилебрандов фактор)

Референтне вредности (норма) активности фон Вилебрандовог фактора су 58-166%.

Фон Вилебрандов фактор синтетишу ендотелне ћелије и мегакариоцити. Неопходан је за нормалну адхезију тромбоцита и има способност да продужи полуживот фактора VIII. Плазма коагулациони фактор VIII - антихемофилни глобулин А - циркулише у крви као комплекс од три подјединице означене као VIII-k (коагулациона јединица), VIII-Ag (главни антигенски маркер) и VIII-vWF (фон Вилебрандов фактор повезан са VIII-Ag). Верује се да фон Вилебрандов фактор регулише синтезу коагулационог дела антихемофилног глобулина А (VIII-k) и да је укључен у васкуларно-тромбоцитни хемостазу.

Фон Вилебрандова болест је наследни поремећај који карактерише повећано време крварења, смањена активност ристоцетинског кофактора и смањена (у различитом степену) коагулантна активност фактора VIII. Клиничке манифестације болести су сличне онима код тромбоцитопатије. Међутим, пацијенти са значајно смањеном активношћу фактора VIII могу имати хематоме и хемартрозу.

На основу лабораторијских студија које нам омогућавају да утврдимо структуру и активност фон Вилебрандовог фактора, разликују се следећи облици болести.

• Тип I (70% свих случајева) карактерише се благим смањењем ристоцетинског кофактора (фон Вилебрандов фактор) и коагулансне активности (VIII-k) са нормалном макромолекуларном структуром фон Вилебрандовог фактора.
• Тип II: заснива се на селективном недостатку високомолекуларних полимера фон Вилебрандовог фактора услед поремећаја у структури овог протеина.
  • Тип IIB је узрокован повећаном интеракцијом између фон Вилебрандовог фактора и тромбоцита, а повећано клиренс агрегата тромбоцита доводи до тромбоцитопеније.
• Тип III карактерише тежак квантитативни недостатак фон Вилебрандовог фактора, што резултира клинички значајним смањењем активности фактора VIII (VIII-k).

Садржај фон Вилебрандовог фактора се одређује у случајевима када је време крварења повећано, број тромбоцита је у оквиру референтних вредности и нема очигледних узрока дисфункције тромбоцита. За процену фон Вилебрандовог фактора одређује се квантитативни садржај фон Вилебрандовог фактора (студија активности ристоцетинског кофактора), проучава се ристоцетином индукована аглутинација тромбоцита и антигена структура фон Вилебрандовог фактора повезаног са фактором VIII (VIII-vWF).

Одређивање агрегације тромбоцита ристоцетином у плазми користи се за квантитативну процену фон Вилебрандовог фактора. Утврђена је линеарна веза између степена агрегације ристоцетина и количине фон Вилебрандовог фактора. Метода се заснива на способности овог антибиотика (ристоцетина) да стимулише in vitro интеракцију фон Вилебрандовог фактора са тромбоцитним гликопротеином Ib. У већини случајева фон Вилебрандове болести, поремећена агрегација ристоцетина се примећује уз нормалан одговор на АДП, колаген и адреналин. Поремећена агрегација ристоцетина се такође детектује код Бернард-Сулијеове макроцитне тромбодистрофије (одсуство рецептора за агрегацију ристоцетина на мембрани тромбоцита). За диференцијацију се користи тест са додатком нормалне плазме: код фон Вилебрандове болести, агрегација ристоцетина се нормализује након додатка нормалне плазме, док се то не дешава код Бернард-Сулијеовог синдрома.

Студија се такође може користити у диференцијалној дијагнози хемофилије А (недостатак фактора VIII) и фон Вилебрандове болести. Код хемофилије, садржај VIII-k је нагло смањен, а садржај VIII-fB је у границама нормале. Клинички, ова разлика се манифестује чињеницом да се код хемофилије јавља хематомски тип повећаног крварења, а код фон Вилебрандове болести петехијално-хематомски тип.

Аглутинација тромбоцита изазвана ристоцетином је смањена у већини случајева фон Вилебрандове болести, осим код типа IIB.

Антигенска структура фон Вилебрандовог фактора повезаног са фактором VIII (VIII-vWF) детектује се различитим имунолошким методама, а дистрибуција фон Вилебрандовог фактора по молекуларној величини одређује се електрофорезом на агарозном гелу. Ови тестови се користе за утврђивање типа фон Вилебрандове болести.

Студија агрегације тромбоцита са различитим индукторима спроводи се не само да би се идентификовали поремећаји функција агрегације тромбоцита. Ова студија омогућава процену ефикасности антитромбоцитне терапије, одабир појединачних доза лекова и спровођење праћења лекова.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]