ПЦР за хепатитис Ц

HCV је обично одсутан у материјалу.

За разлику од серолошких метода дијагностиковања вирусног хепатитиса Ц, које детектују антитела на HCV, PCR омогућава директно откривање присуства HCV РНК и квантификовање њене концентрације у тест материјалу. Тест има специфичност врсте и високу осетљивост: десет молекула HCV РНК у тест материјалу је довољно за његово откривање. Детекција антитела на HCV само потврђује чињеницу инфекције пацијента, али не дозвољава процену активности инфективног процеса (репликације вируса) и прогнозе болести. Поред тога, антитела на HCV се детектују и у крви пацијената са акутним и хроничним хепатитисом, и код оних пацијената који су били болесни и опорављени, а често се антитела у крви појављују тек неколико месеци након почетка клиничке слике болести, што компликује дијагнозу. Детекција HCV у крви помоћу PCR је информативнија дијагностичка метода. Детекција HCV РНК у PCR указује на виремију, омогућава процену репликације вируса у телу и служи као један од критеријума за ефикасност антивирусне терапије. Детекција HCV РНК помоћу PCR у раним фазама вирусне инфекције у потпуном одсуству било каквих серолошких маркера може послужити као најранији доказ инфекције. Међутим, изолована детекција HCV РНК у потпуном одсуству било којих других серолошких маркера не може у потпуности искључити лажно позитиван резултат PCR-а. У таквим случајевима је неопходна свеобухватна процена клиничких, биохемијских и морфолошких студија са поновљеном вишеструком потврдом присуства инфекције помоћу PCR-а.

Употреба ПЦР методе код пацијената са хроничним вирусним хепатитисом Ц је од великог значаја, јер код већине њих недостаје корелација између присуства вирусне репликације и активности ензима јетре. У таквим случајевима, само ПЦР нам омогућава да проценимо присуство вирусне репликације, посебно ако је коначни резултат изражен квантитативно. У већини случајева болести, нестанак ХЦВ РНК из крвног серума се јавља касније од нормализације ензима јетре, тако да њихова нормализација не може послужити као основа за прекид антивирусног лечења.

Практично је важно испитати не само крвни серум, већ и лимфоците и узорке хепатобиопсије користећи PCR методу за детекцију HCV РНК. Вируси се могу детектовати 2-3 пута чешће у ткиву јетре него у крвном серуму. Приликом процене резултата теста крвног серума на HCV РНК, треба имати на уму да виремија може бити флуктуирајуће природе (као и промене у активности ензима). Стога, након позитивних резултата PCR теста, може се добити негативан резултат и обрнуто. У таквим случајевима, боље је испитати узорке хепатобиопсије како би се отклониле све недоумице које се јављају.

Детекција HCV РНК у материјалу помоћу PCR-а користи се у следеће сврхе:

• решавање сумњивих резултата серолошких тестова;
• диференцијација вирусног хепатитиса Ц од других облика хепатитиса;
• идентификација акутног стадијума болести у поређењу са претходном инфекцијом или контактом; одређивање стадијума инфекције новорођенчади од HCV-серопозитивних мајки;
• праћење ефикасности антивирусне терапије.

Пацијенти са сумњом на вирусни хепатитис Ц:

• донатори;
• особе са факторима ризика;
• особе са повишеном активношћу АЛТ;
• пацијенти са акутним хепатитисом

Све горе наведене карактеристике евалуације резултата и приступи дијагнози ХЦВ помоћу ПЦР-а важе и за друге инфекције.

ПЦР метода омогућава не само детекцију ХЦВ РНК у материјалу који се испитује, већ и утврђивање његовог генотипа. Одређивање генотипа вируса је од великог значаја за избор пацијената са хроничним вирусним хепатитисом Ц за лечење интерфероном-алфа и рибавирином. Лабораторијске индикације за лечење хроничног вирусног хепатитиса Ц интерфероном алфа су следеће:

• повећана активност трансаминаза;
• присуство ХЦВ РНК у крви;
• ХЦВ генотип 1;
• висока виремија у крви (више од 8×10⁶ ^копија /мл).

Тренутно је могуће квантитативно одредити садржај HCV РНК у крвном серуму коришћењем PCR методе, што је од великог значаја за праћење лечења интерфероном алфа. Ниво виремије се процењује на следећи начин: са садржајем HCV РНК од 102 ^до 104 ^копија /мл - слаб; од ¹⁰⁵ до 107 ^копија /мл - просечан, изнад 108 ^копија /мл - висок. Уз ефикасно лечење, ниво виремије се смањује.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]