Сви иЛиве садржаји су медицински прегледани или проверени како би се осигурала што већа тачност.
Имамо стриктне смјернице за набавку и само линкамо на угледне медијске странице, академске истраживачке институције и, кад год је то могуће, медицински прегледане студије. Имајте на уму да су бројеви у заградама ([1], [2], итд.) Везе које се могу кликнути на ове студије.
Ако сматрате да је било који од наших садржаја нетачан, застарио или на неки други начин упитан, одаберите га и притисните Цтрл + Ентер.
Анализа полиморфизма дужине рестрикционих фрагмената
Медицински стручњак за чланак
Последње прегледано: 05.07.2025
Широко распрострањена употреба различитих рестрикционих ендонуклеаза за анализу хромозомске ДНК открила је огромну варијабилност људског генома. Чак и мале промене у кодирајућим и регулаторним регионима структурних гена могу довести до престанка синтезе одређеног протеина или до губитка његове функције у људском телу, што обично утиче на фенотип пацијента. Међутим, приближно 90% људског генома чине некодирајуће секвенце, које су варијабилније и садрже многе такозване неутралне мутације, или полиморфизме, и немају фенотипску експресију. Такви полиморфни региони (локуси) се користе у дијагнози наследних болести као генетски маркери. Полиморфни локуси су присутни у свим хромозомима и повезани су са специфичним регионом гена. Одређивањем локализације полиморфног локуса могуће је утврдити који је ген повезан са мутацијом која је изазвала болест код пацијента.
За изоловање полиморфних региона ДНК користе се бактеријски ензими - рестриктазе, чији су производ рестрикциона места. Спонтане мутације које се јављају на полиморфним местима чине их отпорним или, обрнуто, осетљивим на дејство специфичне рестриктазе.
Мутациона варијабилност у рестрикционим местима може се детектовати променом дужине рестрикционих фрагмената ДНК њиховим раздвајањем помоћу електрофорезе и накнадне хибридизације са специфичним ДНК сондама. У одсуству рестрикције у полиморфном месту, на електрофореграмима ће бити детектован један велики фрагмент, а у његовом присуству, биће присутан мањи фрагмент. Присуство или одсуство рестрикционог места у идентичним локусима хомологних хромозома омогућава прилично поуздано обележавање мутантног и нормалног гена и праћење његовог преноса на потомство. Дакле, приликом проучавања ДНК пацијената у оба хромозома код којих је рестрикционо место присутно у полиморфном региону, на електрофореграму ће бити детектовани кратки фрагменти ДНК. Код пацијената хомозиготних за мутацију која мења полиморфно рестрикционо место, детектоваће се дужи фрагменти, а код хетерозиготних пацијената, кратки и дуги фрагменти.
[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]