Антитела на нуклеинске антигене (антинуклеарни фактор) у крви

Код здравих особа, титар антитела на нуклеарне антигене у крвном серуму је 1:40-1:80 (клинички значајан титар је ≥1:160 када се користи метода индиректне имунофлуоресценције; када се користе методе скрининга - испод 1:50).

Антинуклеарни фактор - антитела на цело једро. Ово је хетерогена група аутоантитела која реагују са различитим компонентама једра. Одређивање антитела на нуклеарне антигене у крвном серуму је тест за системске болести везивног ткива. Скрининг на присуство антинуклеарних антитела у крвном серуму спроводи се радиоимунолошким тестом (РИА), реакцијом фиксације комплемента (РФК) или ЕЛИСА тестом.

Позитивне резултате скрининга треба потврдити методом индиректне имунофлуоресценције. Као ћелијски супстрат користе се препарати припремљени из суспензије ћелија са великим једрима [из људских епителних ћелија HEp-2 линије - ћелије рака ларинкса, или пресеци јетре миша]. Врста бојења (природа дистрибуције флуоресцентне ознаке у ћелијама) је различита за различите болести и одређује правац даљег одређивања специфичности антинуклеарних антитела.

• Дифузно бојење (равномерна расподела ознаке) је најмање специфично, могуће код системског еритематозног лупуса, синдрома лупуса изазваног лековима и других аутоимуних болести, као и код старијих особа. У случају дифузног бојења ћелија, реакција се мора поновити са већим разблажењем крвног серума који се тестира. Ако тип бојења остане исти, највероватније је да је антиген против којег су усмерена антинуклеарна антитела дезоксирибонуклеопротеин.
• Хомогено или периферно бојење се примећује када у серуму који се испитује преовлађују антитела на дволанчану ДНК. Ова врста бојења се најчешће налази код системског еритематозног лупуса.
• Пегаво или шарено бојење је последица антитела на екстраховане нуклеарне антигене и обично се види код мешовите болести везивног ткива, Сјогреновог синдрома и синдрома лупуса изазваног лековима.
• Нуклеоларно бојење (дистрибуција ознака у нуклеолима) је узроковано антителима на рибонуклеопротеин (видети доле). Ова врста бојења је типична за системску склеродерму, а повремено је могућа и код других аутоимуних болести.
• Центромерно или дискретно пегаво бојење узроковано је антителима на центромеру (специјализовани домен хромозома) и карактеристично је за CREST синдром и друге аутоимуне реуматске болести.

Главни циљ студије за антинуклеарна антитела је идентификација системског еритематозног лупуса, јер се код ове болести она појављују у крвном серуму 95% пацијената у року од 3 месеца од њеног почетка.

Одређивање антитела на нуклеарне антигене је од великог значаја за дијагностику колагеноза. Код нодуларног полиартеритиса, титар (применом метода скрининга) може порасти на 1:100, код дерматомиозитиса - на 1:500, код системског еритематозног лупуса - на 1:1000 и више. Код системског еритематозног лупуса, тест за детекцију антинуклеарног фактора има висок степен осетљивости (89%), али умерену специфичност (78%) у поређењу са тестом за детекцију антитела на нативну ДНК (осетљивост 38%, специфичност 98%). Антитела на нуклеарне антигене су високо специфична за системски еритематозни лупус. Одржавање високог нивоа антитела током дужег времена је неповољан знак. Смањење титра предсказује ремисију или (понекад) фаталан исход.

Код склеродерме, учесталост детекције антитела на нуклеарне антигене је 60-80%, али је њихов титар нижи него код системског еритематозног лупуса. Не постоји веза између титра антинуклеарног фактора у крви и тежине болести. Код реуматоидног артритиса често се разликују облици болести слични СЛЕ, па се антитела на нуклеарне антигене детектују прилично често. Код дерматомиозитиса, антитела на нуклеарне антигене у крви се детектују у 20-60% случајева (титар до 1:500), код нодуларног полиартеритиса - у 17% (1:100), код Шегренове болести - у 56% када се комбинује са артритисом и 88% случајева код Гугеро-Шегреновог синдрома. Код дискоидног еритематозног лупуса, антинуклеарни фактор се детектује код 50% пацијената.

Поред реуматских болести, антитела на нуклеарне антигене у крви се детектују код хроничног активног хепатитиса (у 30-50% случајева), а њихов титар понекад достиже и 1:1000. Аутоантитела на нуклеарне антигене могу се појавити у крви код инфективне мононуклеозе, акутне и хроничне леукемије, стечене хемолитичке анемије, Валденстремове болести, цирозе јетре, билијарне цирозе, хепатитиса, маларије, лепре, хроничне бубрежне инсуфицијенције, тромбоцитопеније, лимфопролиферативних болести, мијастеније и тимома.

У скоро 10% случајева, антинуклеарни фактор се детектује код здравих људи, али у ниским титрима (не више од 1:50).

Последњих година развијена је метода ензимског имунотестирања за одређивање антинуклеарних антитела различитих спектара, која се лако изводи и постепено замењује имунофлуоресцентну методу.

Низ лекова може довести до лажно позитивног повећања титра антинуклеарних антитела: аминосалицилати, карбамазепин, изониазид, метилдопа, прокаинамид, јодиди, орални контрацептиви, тетрациклини, тиазидни диуретици, сулфонамиди, нифедипин, β-блокатори, хидралазин, пенициламин, нитрофурантоин итд., због способности ових лекова да изазову интерференцију током студије.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ]